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硅膠色譜柱的使用方法

更新時(shí)間:2024-04-07  |  點(diǎn)擊率:908
硅膠因其優(yōu)良的機(jī)械強(qiáng)度和表面易改性等特征,已成為應(yīng)用廣泛的色譜柱填料。硅膠柱具有柱效高、選擇性好及分析速度快等特點(diǎn),因而被廣泛用于分離極性小分子如藥物,而用于糖、肽或蛋白質(zhì)分離較少。
 
硅膠色譜柱是一種常用的分離柱,適用于化合物的分離和純化。下面介紹硅膠色譜柱的使用方法:
1.準(zhǔn)備工作
將硅膠色譜柱安裝在色譜系統(tǒng)中,先用純?nèi)軇┻M(jìn)行預(yù)洗,以去除任何可能殘留在色譜柱中的雜質(zhì)。
2.樣品制備
將樣品溶解在適當(dāng)?shù)娜軇┲?,使其濃度達(dá)到適當(dāng)?shù)臐舛龋员阍谏V柱中進(jìn)行分離。同時(shí),需要去除可能影響分離的雜質(zhì)。
3.進(jìn)樣
將樣品注入到色譜柱項(xiàng)端的進(jìn)樣口中,注意不要將空氣泡進(jìn)入色譜柱中。
4.洗脫
通過(guò)向色譜柱中注入一一 系列不同極性的溶劑,讓樣品在硅膠層中進(jìn)行分離。通常情況下,極性較低的溶劑先行通過(guò),隨著溶劑極性的逐漸增加,樣品分離出來(lái)的時(shí)間也會(huì)有所不同。
5.收集和檢測(cè)
在分離過(guò)程中,將分離出來(lái)的化合物收集起來(lái),進(jìn)行后續(xù)的檢測(cè)和分析。
6.清洗
在結(jié)束實(shí)驗(yàn)后,需要使用純?nèi)軇?duì)硅膠色譜柱進(jìn)行清洗,以便下次再次使用。

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