每當(dāng)購買一根新色譜柱時，活化沖洗是一個必須操作的步驟。

全新色譜柱一般都是保存在一定的保護(hù)液中的。活化的目的是將新柱中的封存液替換，并且沖洗掉色譜柱中的雜質(zhì)。還可以排除色譜柱中有機(jī)溶液的揮發(fā)所產(chǎn)生的氣泡殘留，發(fā)揮色譜柱的效能。不僅如此，活化還能使色譜柱內(nèi)硅膠上的鍵合基團(tuán)達(dá)到更好的排列，有利于樣品的分離。

Kromasil色譜柱根據(jù)不同固定相情況，推薦以下活化方法，其他品牌色譜柱需要在咨詢廠商技術(shù)工程師確認(rèn)后進(jìn)行參考。

1、反相色譜柱（C18、C8、Phenyl、PhenylHexyl等）

①    80%甲醇（乙腈）-水溶液，低流速沖洗20-30個柱體積；

②    50%甲醇（乙腈）-水溶液，低流速沖洗20-30個柱體積；

③    初始比例流動相平衡10-30個柱體積。

*若流動相中含有緩沖鹽，則需要在步驟③中采用無緩沖鹽的初始比例流動相進(jìn)行平衡后，額外增加步驟④使用含有緩沖鹽得初始比例流動相平衡10-30個柱體積。

2、正相色譜柱（SIL、NH、CN等）

①    流動相平衡20-30個柱體積；

*若需要在反相條件下使用氨基、氰基等固定相的正相柱，需要參照以下步驟執(zhí)行：

①    100%異丙醇溶液沖洗50-100個柱體積；

②    初始比例流動相平衡20-30個柱體積。

3、HILIC色譜柱（HILIC-D等）

①    50%乙腈-水溶液沖洗50個柱體積；

②    初始比例流動相平衡10-20個柱體積。

注意：任何含有緩沖鹽的流動相都需要在無緩沖鹽的初始比例流動相充分平衡后方才使用含有緩沖鹽得溶液進(jìn)行平衡，否則將出現(xiàn)鹽析等不可逆色譜柱損害。并且，在進(jìn)行色譜柱活化及使用時需要反復(fù)確認(rèn)溶液間的互溶性。

以下為常見Kromasil色譜柱出廠封存溶液參考

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鯤霆生物現(xiàn)為Nouryon旗下品牌Kromasil液相色譜柱及制備填料中國區(qū)總代理。主營業(yè)務(wù)為代理銷售各類實驗室精密儀器、試劑耗材以及相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)開發(fā)與咨詢服務(wù)。
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